PCR metodou
Metoda PCR (polymerázová řetězová reakce) je "zlatým standardem" moderní DNA diagnostiky, vysoce citlivé metody molekulární biologie. PCR metodou se používá v lékařství, genetice, kriminologie a dalších oblastech. Často a úspěšně se používá při diagnostice mnoha infekčních onemocnění.
Diagnostika infekčních onemocnění pomocí PCR
Studie pomocí PCR umožňuje detekovat nejen samotný patogen, ale i jediný fragment cizorodé DNA ve studovaném materiálu. Vyšetřený (biologický) materiál je: žilní krve, epiteliální buňky a tajemství genitálního traktu, spermií, slin, sputa a dalších biologických sekrecí. Nutný biologický materiál je určen zamýšleným onemocněním.
Metoda PCR v naší době samozřejmě je silným diagnostickým nástrojem. Snad jedinou nevýhodou studia je její vysoká cena.
V seznamu nemocí, jejichž přítomnost může být stanovena pomocí PCR, jsou přítomny:
- virové a bakteriální pneumonie;
- tuberkulóza;
- spalničky, zarděnky, parotitis;
- infekční hepatitida všech forem;
- salmonelóza, záškrtu;
- Helikobakterióza a onemocnění způsobená střevními infekcemi;
- STD (pohlavně přenosné nemoci): kapavka, chlamydie, ureaplasmóza, syfilis, AIDS, genitální herpes, gardnerellezis a další.
Screening pro STI pomocí PCR
Na rozdíl od tradičních analýz metoda PCR umožňuje detekovat sexuálně přenosné infekce (STI) dokonce v úplné nepřítomnosti jejich příznaků. Pro shromažďování biologického materiálu jsou ženy vymývány epiteliální buňky cervikálního kanálu, muži - škrábání močové trubice. V případě potřeby se metoda venózní krve provádí metodou PCR.
Test STI pomocí metody PCR tak umožňuje identifikovat:
- virus viru lidské imunodeficience (HIV);
- bledý treponém (příčinný účinek syfilis);
- Virus viru herpes simplex a cytomegalovirus;
- lidský papilomavirus (HPV);
- chlamydie, toxoplasma, mykoplazmy, ureaplasmy a další genitální infekce.
Pokud se analýza PCR provádí správně, je vyloučena pravděpodobnost falešně pozitivních výsledků. Samostatně je třeba uvést lidský papillomavirus (HPV) a význam PCR metody pro jeho diagnózu. Na rozdíl od onkocytologického nálevu metodou PCR je možné určit specifický typ HPV, zejména jeho onkogenní typy 16 a 18, jejichž přítomnost ohrožuje ženu s tak závažnou a často fatální nemocí rakovinu děložního čípku . Včasná detekce onkogenních typů HPV metodou PCR často poskytuje příležitost zabránit vzniku rakoviny děložního čípku.
Imunoenzymová analýza (ELISA) a metoda polymerázové řetězové reakce (PCR): plusy a mínusy
Která diagnostická metoda je lepší: PCR nebo ELISA? Správná odpověď na tuto otázku neexistuje, neboť v podstatě diagnóza s pomocí těchto dvou studií má jiné účely. Kromě toho se používají metody ELISA a PCR v kombinaci.
Výzkum pomocí PCR je nezbytný k určení specifického původu infekce, může být zjištěn ihned po infekci, a to navzdory absenci symptomatického projevu nemoci. Tato metoda je ideální pro detekci skrytých a chronických bakteriálních a virových infekcí. 
S ním můžete současně identifikovat několik patogenů a během terapie vám metoda PCR umožňuje posoudit její kvalitu stanovením počtu kopií cizí DNA.
Na rozdíl od metody PCR je metoda ELISA navržena tak, aby detekovala ne samotné infekční agens, ale imunitní odpověď těla na ni, tj. Detekovat přítomnost a množství protilátek proti určitému patogenu. V závislosti na typu zjištěných protilátek (IgM, IgA, IgG) lze určit stupeň vývoje infekčního procesu.
Obě metody a PCR a ELISA mají vysokou spolehlivost (100 a 90%). Je však důležité poznamenat, že analýza ELISA v některých případech dává falešnou pozitivitu (v případě, že osoba měla určitou nemoc v minulosti) nebo falešně negativní (pokud došlo k relativně nedávné infekci).