Skladování spermií
Tato metoda ukládání spermií (ejakulát), jako kryokonzervace, se v kryomedicíně rozšířila. Zahrnuje přidání speciálního média do semínkové tekutiny a jeho další zmrazení pomocí kapalných dusíkových par. Zvažte tento způsob konzervace zárodečných buněk mužského pohlaví podrobněji a řekněte, co je spermie vhodné pro ředění a další skladování.
Během přirozeného oplodnění se tajemství mužských pohlavních žláz částečně míchá s buňkami epidermis, což vede k určité změně pH prostředí, což vede k destrukci krytí lipoproteinů spermií, tj. k jejich aktivace. V takovém stavu je životnost zárodečných buněk ostře omezena, což znemožňuje jejich další použití pro IVF. Proto používají tuto metodu kryokonzervace.
Tato technika výrazně zvyšuje trvanlivost spermií a umožňuje:
- snížit motilitu spermií;
- poskytuje jim dodatečný zdroj energie;
- chrání membrány zárodečných buněk před ničením;
- zabraňuje akumulaci toxických metabolických produktů;
- blokuje reprodukci mikroorganismů v ejakulátu.
Jaké média se používají k ukládání spermií?
Aby se usnadnil tzv. Proces rozdrcení ejakulátu, který je nutný k izolaci zárodečných buněk, provádí se předběžné zředění spermií. Současně používejte speciální činidla.
Dnes je obvyklé používat syntetická média pro ukládání spermií, z nichž každá vyžaduje zvláštní podmínky. Tento typ prostředí se zpravidla skládá z několika složek, obvykle alespoň tří. Takže v jejich složení lze rozlišit cukry, nejčastěji používanou glukózu a laktózu, citrát sodný.
Pokud mluvíme o specifických chemických sloučeninách, které lze použít jako skladovací médium pro spermie, pak mezi nimi lze nazývat Tris pufr, Trilon B, EDTA, Spermosan PPK.
Za jakých podmínek je uložena ejakulace?Technologie zmrazování a skladování spermií vyžaduje dodržování zvláštního režimu chlazení a použití speciálních zařízení. Současně musí být laboratoř sama vybavena nástroji, které sterilizují vzduch.
Před tím, než se ejakulát shromažďuje, jsou všechny potřebné kryokonzervační prostředky, zejména různé baňky, měřicí válce, pipety, papírové filtry sterilizovány ve speciální skříni při teplotě 130 až 150 stupňů. Před přímým řízením plotu jsou umístěny ve speciálním termostatu, který udržuje konstantní teplotu 37 stupňů.
Po odebrání vzorku samčího spermatu se umístí do sterilní baňky. Teplota skladu spermatu by měla být konstantní. Proces chlazení se provádí ve dvou fázích.
V prvním z nich se ejakulát nejprve umístí do chladicí komory, ve které se teplota postupně snižuje. Hodnota je spravidla -35 stupňů. Poté se hluboké zmrazení provádí ponořením speciální baňky se spermatem do kapalného dusíku. V tomto stavu může trvanlivost spermie dosáhnout několika desetiletí.
Chcete-li použít ejakulát před kryokonzervováním, je nádoba umístěna v teplé vodě, kde dochází k pomalému rozmrazení. Poté se použité kryoprotektanty odstraní opakovaným přesrážením spermií v odstředivce. Poté se samotná semenná tekutina nahradí živným médiem, ve kterém jsou spermie následně umístěny.